干细胞疗法对11例乙型肝炎肝硬化患者疗效评估

肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，引起肝硬化的病因有很多，欧美国家以酒精性肝硬化为主，而我国是以乙型肝炎引发的肝硬化为主，肝硬化患者的HBsAg阳性率高达76.7％，其形成机制主要是由于肝炎病毒感染导致广泛性肝细胞变性坏死、肝小叶结构破坏、肝脏弥漫性纤维化、结节性再生同时伴有假小叶形成，肝脏逐渐变形、变硬而发展为肝硬化。

传统疗法常选用保肝、降酶、退黄等基础治疗，而终末期肝硬化临床治疗效果差，缺乏广泛可行的治疗手段。干细胞疗法的出现，以其独特的生物学特性，为肝病治疗带来新的治疗思路。

背景：为了提高肝硬化疗效，本研究采用了人脐带血单个核细胞联合人脐带间充质干细胞治疗肝硬化，笔者前期临床研究发现，人脐带血单个核细胞具有极其良好的提高患者免疫的功效，因此先行输注人脐带血单个核细胞，改善患者整体状况，提高其免疫功能。

而后输入人脐带间充质干细胞，使其归巢到肝脏，分化为肝细胞或进入肝脏后修复受损的肝细胞，并可通过某些细胞因子的改变，来调节免疫、减轻炎症反应、抗肝细胞凋亡、促进血管增生、抗肝纤维化等修复损伤肝组织，同时促进人脐带间充质干细胞的多向分化。两种细胞联合治疗，以更好的发挥其疗效。

目的：探讨人脐带血单个核细胞（hUCB-MNCs）联合人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）对乙型肝炎相关失代偿期肝硬化患者的肝功能、炎症程度及免疫功能的影响。

方法：选取2017年11月—2020年6月研究人员选取11例肝硬化患者，所纳入患者第1周输注1次hUCB-MNCs（ ＞18×10^9/次），第2、3、4周每周输注1次hUC-MSCs，每次输注1×10^6／kg，在治疗结束的第４、8、12周进行复查，对比治疗前后肝功能、血氨、凝血因子、血清细胞因子及淋巴细胞亚群的变化，同时观察记录神经、精神症状的改变。

人脐带血单个核细胞联合人脐带间充质干细胞输注后各项指标评估

肝功能、血氨及其他状况的影响：对PT和PTA影响最快，细胞输注结束后第４周即可显著改善（Ｐ值均＜0.05），而患者的肝功能酶学指标在细胞输注后第８周逐渐恢复到正常水平（Ｐ值均＜0.05），在输注结束第12周时，肝功能指标较之前明显好转（Ｐ值均＜0.01）（表２）。

细胞输注４周后，患者血清中血氨浓度明显降低（Ｐ＜0.05），随着时间的延长，血氨水平持续下降，除患者No.7、10、11外，其他患者在人脐带血单个核细胞和人脐带间充质干细胞输注12周后均降低到正常水平（Ｐ值均＜0.05）（表３）

细胞输注后第４、８周，５例肝硬化腹水患者的腹水均有所减少，除却N0.10患者仍有少量腹水，且Child-Pugh分级仍然处于Ｃ级。10例患者的乏力、食欲、睡眠、精神、腹胀、下肢水肿等明显改善，血清胆红素及PT基本恢复正常，血清Ａlb也明显升高，Child-Pugh评分随之降低，差异有统计学意义（Ｐ值均＜0.05）（表４）。

血清细胞因子和淋巴细胞亚群的影响：采集患者静脉血，ELISA定量检测hUCB-MNCs和hUC-MSCs输注前后血清炎性和抗炎细胞因子的含量，结果显示输注４周后患者血清炎性细胞因子lL-6、TNFα水平均明显降低（Ｐ值均＜0.01），从８到12周，其血清中含量持续维持在正常水平；患者血清抗炎细胞因子IL-10、TGFβ在治疗后４周显著上升（Ｐ值均＜0.01），４周后基本恢复到正常值，到治疗后的12周，其表达水平一直维持在正常值（表５）。

讨论：人脐带血单个核细胞联合人脐带间充质干细胞输注治疗可通过影响机体的免疫状况来调节免疫性疾病的转归，可能产生的副作用目前还在随访观察中。截至目前，11例入组治疗患者均未发现明显的不良反应。这些研究结果为人脐带血单个核细胞联合人脐带间充质干细胞可以优化肝功能且抑制病情发展提供了有力的依据。

总结：人脐带血单个核细胞联合人脐带间充质干细胞输注可以分化为肝细胞或进入肝脏后修复受损的肝细胞，抑制炎性因子释放，上调Treg水平，从而调节肝硬化患者免疫功能，改善患者一般状态。针对检测指标的改变，对其治疗肝硬化的免疫调节机制进行评价，为终末期肝病的治疗探索新方法。